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构建一种测定失眠大鼠脑内神经递质的新方法

发布时间:2013/10/20 09:25:08   发布机构:科研处   浏览次数:

随着社会生活节奏的不断加快以及生活压力的增加,睡眠障碍已经成为人们日常生活中所面对的越来越重要的问题。世界卫生组织调查显示,全球约有29%的人存在各种睡眠问题,中国居民睡眠障碍患病率高达42.7%,其中失眠患者所占比例最高。目前有关睡眠机制尚不完全清楚,但体内神经递质变化对睡眠的影响已有较多研究。现代医学研究结果表明,机体是受神经和神经递质的共同调节以达到睡眠-觉醒平衡。睡眠与觉醒所涉及的神经机制非常复杂,多种神经递质参与了睡眠与觉醒生理周期的调控,如五羟色胺(5-HT)及其代谢产物五羟吲哚乙酸(5-HIAA)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、乙酞胆碱(Ach)等。因此建立一种同时测定失眠大鼠体内多种神经递质的方法,从而比较各种递质在体内的变化规律,可以为失眠的诊断与预防提供依据。

我校毕开顺教授课题组已建立的一个快速,灵敏的UFLC-MS/MS方法测定大鼠脑内7种神经递质5-HIAA, Ach, Try, GABA, Glu,5-HT, NE, DA的含量。该方法采用4000Q UFLC-MS/MS系统,以正离子方式检测;色谱柱为Inertsil ODS-EP (150mm × 4.6mm, 5μm),以甲醇-0.01%乙酸水为流动相,采用梯度洗脱;方法中各待测物的线性关系良好(R2≥0.9915),日内精密度和日间精密度均符合要求,平均提取回收率在80%以上。所建立的方法成功的测定了正常与失眠大鼠脑内7种神经递质的含量。将得到的各待测物在大鼠脑内的浓度经对数转换后应用SPSS 16.0进行独立样本t检验,判断失眠组与正常组大鼠脑内神经递质及其代谢产物的差异。结果显示5-HIAA, Ach, Glu,5-HT, NE, DA在两组中具有显著性差异,而Try和GABA则无明显差异。

目前,该方法及结果以题目为Rapid analysis of neurotransmitters in rat brain using ultra-fast liquid chromatography and tandem mass spectrometry: application to a comparative study in normal and insomnic rats,发表在杂志Journal of Mass Spectrometry(影响因子为3.214)上。本方法为以后神经递质的测定提供了一个参考,为失眠的诊断与治疗提供依据,具有极其重要的理论与实际意义。

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